4-Нитрофенил бета-D-галактопиранозид CAS:200422-18-0

Нәтиҗә: ONPG - β-галактозидаза ферментының булуын һәм активлыгын ачыклау өчен махсус кулланыла торган субстрат. β-галактозидаза ферменты булганда һәм актив булганда, ул ONPGны ике продуктка аера: o-нитрофенол һәм галактоза туындысы. O-нитрофенолның бүленеп чыгуы сары төс үзгәрүенә китерә, аны спектрофотометр ярдәмендә үлчәп була.

Кулланылышы: ONPG молекуляр биология һәм биохимия тикшеренүләрендә берничә кулланылышка ия:

β-галактозидаза активлыгын билгеләү: ONPG гадәттә β-галактозидаза ферментының активлыгын үлчәү һәм санлаштыру өчен кулланыла. Фермент активлыгына турыдан-туры пропорциональ булган о-нитрофенол формалашу тизлеген спектрофотометрик ысул белән үлчәргә мөмкин.

Ген экспрессиясе һәм көйләү: ONPG еш кына ген экспрессиясе һәм көйләү тикшеренүләренә бәйле экспериментларда кулланыла. Ул еш кына кушылу аксымы анализларында, мәсәлән, еш кулланыла торган lacZ кушылу системасы кебек, билгеле бер промоторлар контролендәге геннар экспрессиясен өйрәнү өчен кулланыла. ONPG ярдәмендә үлчәнгән бета-галактозидаза активлыгы ген экспрессиясе дәрәҗәсен аңларга ярдәм итә.

β-галактозидаза активлыгын тикшерү: ONPG рекомбинант ДНК технологиясендә колориметрик тикшерү ысулы буларак кулланылырга мөмкин, ул β-галактозидазаны кодлый торган LacZ генының булуын һәм функциональлеген ачыклау өчен кулланыла ала. Бу тикшерү ысулы кызыксыну тудырган генны үз эченә алган клоннарны ачыкларга ярдәм итә.

Фермент кинетикасын өйрәнү: ONPG шулай ук ​​β-галактозидаза ферментының кинетикасын өйрәнүдә дә файдалы. Төрле субстрат концентрацияләрендә фермент-субстрат реакциясе тизлеген үлчәү юлы белән Михаэлис-Ментен константалары (Km) һәм максималь реакция тизлекләре (Vmax) кебек кинетик параметрларны билгеләргә мөмкин.