Тирә-юньдә бик гади булмаган геройлар бар, алар гади кебек тоелалар, ләкин чынлыкта алар безгә тавышсыз гына өлеш кертә.Протеиназ К - молекуляр диагностика индустриясендә "аерылмаган герой", тармактагы "зур һәм көчле" белән чагыштырганда, К протеиназы шулкадәр түбән, без аның мөһимлеген күптән оныттык.Яңа таҗ эпидемиясе башлангач, К протеиназына ихтыяҗ артты, һәм илдә һәм чит илдә тәэмин итү кулланудан күпкә артта калды, һәм кинәт К протеиназының бик мөһимлеген һәркем аңлады.
К протеиназын куллану нәрсә ул?
Протеиназ К - протеолитик фермент активлыгы булган серин протеазы һәм киң мохиттә (pH (4-12.5), югары тозлы буфер, югары температура 70 ° C һ.б.) саклый ала.Моннан тыш, К протеиназ активлыгы SDS, карбамид, EDTA, гуанидин гидрохлорид, гуанидин изотиокянат һ.б. белән тыелмый, һәм билгеле күләмдә юу юлы шулай ук К протеиназы активлыгын көчәйтә ала Медицина ярдәмендә (вирус һәм микробиаль дезинфекция) ), ризык (ит тендеризациясе), күн (чәчне йомшарту), шәраб ясау (спиртны ачыклау), аминокислотаны әзерләү (бозылган мамыклар), нуклеин кислотасын чыгару, ситу гибридизациясендә һ.б.Иң еш кулланыла торган кушымта - нуклеин кислотасын чыгару.
К протеинасы үрнәктәге барлык төр протеиннарны, шул исәптән нуклеин кислоталары белән тыгыз бәйләнгән гистоннарны да энзимолизлый ала, шулай итеп нуклеин кислоталары үрнәктән чыгарылып, экстрактка чыгарыла, киләсе адымны җиңеләйтә.Вируслы нуклеин кислотасын ачыклаганда, К протеиназы вирус сайлау эремәсендә мөһим компонентларның берсе.К протеинасы вирусның пальто протеинын ярырга һәм активлаштырырга мөмкин, бу ташу һәм ачыклау этабында куркынычсызрак;Моннан тыш, К протеиназы шулай ук RNase-ны деградацияли ала, вируслы РНКның деградациясен булдырмый һәм нуклеин кислотасын табуны җиңеләйтә.
Протеиназ Кның төнге даны
Фәнни тикшеренүләр өлкәсендә дә, IVD өлкәсендә дә, нуклеин кислотасын чыгару - иң төп эксперимент, шуңа күрә К протеиназы һәрвакыт бик мөһим булган.Ләкин, элек, протеиназ К аның роленә караганда азрак билгеле иде.Моның зур өлеше К протеиназының тәэмин итү һәм сорау бәйләнеше бик тотрыклы булганга иде.Бик аз кеше К протеиназы белән тәэмин итү проблема булыр дип уйлый.
Яңа таҗ эпидемиясе башлангач, нуклеин кислотасын сынауга сорау артты.2020 елның июнь ахырына Кытай 90 миллионга якын яңа таҗ сынауларын тәмамлады, һәм бу сан дөнья күләмендә тагын да куркынычрак.Нуклеин кислотасын чыгару экспериментларында К протеиназының эш концентрациясе якынча 50-200 мг / мл.Гадәттә, нуклеин кислотасы үрнәген чыгару өчен якынча 100 μг протеиназ К кирәк.Фактта куллануда, нуклеин кислотасын чыгаруның эффективлыгын күтәрү өчен, К протеинасы еш артачак.Нуклеин кислотасы яңа коронавирусны ачыклау күп күләмдә К протеиназын китерде.К протеиназының оригиналь тәэмин итү һәм сорау балансы тиз бозылды, һәм К протеиназы төнлә эпидемияне профилактикалау өчен мөһим материалга әйләнде.
К протеиназ җитештерүдә кыенлыклар
Эпидемия үсеше белән, К протеиназының мөһим кыйммәте кешеләр тарафыннан бәяләнсә дә, К протеиназының артык аз ачкычы аркасында, К протеиназы җитештерүдә бик аз эчке компанияләр катнашуы оят. Протеиназ К производствосын булдырырга тели Производство процессында К протеиназының бик махсус протеин булуы ачыкланды.Кыска вакыт эчендә К протеиназ җитештерү куәтен киңәйтү бик авыр.
К протеиназының зур күләмле производствосы түбәндәге кыенлыклар белән очраша
1. Түбән белдерү
Протеиназ К күпчелек протеиннарны махсус рәвештә деградацияләргә һәм хуҗа күзәнәкләренә җитди агулану китерергә мөмкин.Шуңа күрә К протеиназының белдерү дәрәҗәсе гадәттә бик түбән.Протеиназ K-ны югары чагылдырган экспресс-системаларны һәм штаммнарны скринклау гадәттә озын цикл таләп итә.
2. Пигментлар һәм нуклеин кислоталары калдыклары
Зур масштаблы ферментация күп күләмдә пигмент һәм хуҗа нуклеин кислотасы калдыкларын кертә.Бу пычракларны гади чистарту процессы белән бетерү кыен, һәм катлаулы чистарту бәяне арттыра һәм торгызу темпын киметә.
3. Тотрыксызлык
Протеиназ К җитәрлек тотрыклы түгел, ул үзен энзимолизлый ала, һәм аны саклагычсыз 37 ° C озак тоту кыен.
4. imиңел
К протеиназның туңдырылган кипкән порошогын әзерләгәндә, туңдырылган кипкән порошоктагы К протеиназының каты булуын тәэмин итү өчен, югары концентрациядә туңдырылган киптерелгән саклагыч өстәргә кирәк, ләкин К протеиназ концентрациясе 20мг / мл һәм аннан да югары, бу җиңел.
5. Зур инвестицияләр
Протеиназ К көчле протеаз активлыгына ия һәм лабораториядә башка протеазларны гидролизлый ала.Шуңа күрә, протеиназ К махсус производство өлкәләрен, җиһазларны, тикшеренүләр, үсеш һәм җитештерү өчен персонал таләп итә.
XD BIOCHEM протеиназ K эремәсе
XD BIOCHEM җитлеккән протеинны чагылдыру һәм чистарту платформасына ия, һәм рекомбинант аксымнарны чагылдыруда һәм чистартуда, җитештерү процессларын оптимизацияләүдә бай тәҗрибәгә ия.Тикшеренү һәм үсеш коллективын тиз формалаштыру аркасында, К протеиназының зур масштаблы җитештерү процессы җиңелде.Туңдырылган кипкән порошокның айлык чыгышы 30 КГдан артык.Продукциянең тотрыклы эшләнеше, югары ферментларның активлыгы бар, һәм цитохром һәм нуклеин кислотасы калдыклары юк.XD BIOCHEM белән элемтәгә керергә рәхим итегез Сынау пакетын алыгыз (E-mail:sales@xdbiochem.comТелефон: +86 513 81163739).
XD BIOCHEM-ның техник чишелешләре керә
Күп күчермәле плазмид интеграциясен кулланып, 8g / L экспрессия дәрәҗәсе булган югары экспрессив штаммнар сайлана, бу протеиназның түбән экспрессия дәрәҗәсе проблемасын җиңә.
Күп этаплы чистарту процессын булдыру аша, цитохром һәм К протеиназының нуклеин кислотасы калдыклары стандарт бәядән уңышлы чыгарылды.
Саклагыч буфер формуляцияләрен югары үткәрү аша, K протеиназын 37 ° C ка тотрыклы саклый алган буфер сайланды.
Тикшерү буферлары проблеманы җиңә, протеиназ Кны туплау һәм югары концентрацияләрдә яудыру җиңел, һәм K протеиназының югары каты эчтәлеген туңдыру-киптерү өчен нигез сала.
XD BIOCHEM протеиназ K үрнәге
XD BIOCHEM протеиназ K тотрыклылыгы тесты: бүлмә температурасында 80 дтан соң активлыкта зур үзгәрешләр булмаячак
XD BIOCHEM протеиназ K тотрыклылыгы тесты: бүлмә температурасында 80 дтан соң активлыкта зур үзгәрешләр булмаячак.
XD BIOCHEM протеиназ K һәм көндәш продуктларның нуклеин кислотасын чыгару эффектын чагыштыру.Нуклеин кислотасын чыгару процессында XD BIOCHEM һәм конкурентлы протеиназ K кулланыла.XD BIOCHEM протеиназ K чыгару эффективлыгы югарырак һәм максатлы генның Ct бәясе түбәнрәк.
Пост вакыты: 31-2021 декабрь